酶是生物體中活細胞產生的一種具有催化作用的物質,與酸、堿等無機或有機的催化劑相比,酶是具有高的專一性的催化劑,且其化學本質是蛋白質,這說明酶是一種特殊的生命催化劑。

  1.1、影響酶反應的主要因素

  1.1.1、抑制劑的影響

  抑制劑是對酶反應速度有十分重要的影響。抑制可分為不可逆抑制和可逆抑制。常用的抑制劑中不可逆抑制劑有2種,一種是專一地和特定(側鏈氨基酸)基團反應的試劑;另一種是根據酶的作用機制修飾酶的特定位點的專一性試劑。

  1.1.2、pH值的影響

  酶反應是在一定的條件下進行的,酸、堿既能影響酶的穩定性,也能直接影響酶的催化活性。酶都有一定的酸堿穩定性范圍,超出這個范圍后,酶就會變性失效。

  1.1.3、溫度的影響

  溫度既能改變酶反應本身的速度,也能導致酶蛋白變性失效,酶反應速度隨溫度升高而增大,但超過適溫度后,反應速度隨溫度升高而下降。而且,由于溫度使蛋白質變形是隨時間累加的,導致不同的反應時間測得的適溫度往往不同。

  1.2、酶的穩定型與保存

  1.2.1、酶的劑型

  酶制劑常以4種劑型供應,即液體酶制劑、固體酶制劑、酶制劑、固定化酶制劑。由于酶的特性使得如何提高酶的穩定性,延長其有效期是各行業需解決的問題。

  1.2.2、影響酶的穩定性因素

  ① 溫度

  大多數酶可在低溫條件下(0～4℃)使用、處理和保存。但有些酶的結構的穩定性與疏水鍵有關;許多酶可在液氮或-80℃中凍結保存;冰凍干燥也是一種好的有效方法。

  ② pH值和緩沖液

  大多數酶僅在各自特定pH值范圍內穩定,超出此范圍則迅速失效,緩沖液的種類有時也會影響酶的穩定性。

  ③ 酶蛋白濃度

  酶的穩定性因酶性質和度而異，一般情況下，酶蛋白在高濃度時較為穩定，而在低濃度時則易于解離、吸附,甚至易發生表面變形而失效。④氧化

  某些酶為巰基酶，可能由于巰基氧化而在空氣中逐漸失活，這種情況下加入1mmol/L的EDTA或DTT等有助于增加穩定性。

  1.2.3、穩定酶的方法

  目前，穩定酶的方法有如下幾種：添加底物抑制劑和輔酶，添加—SH保護劑，添加表面活性劑，添加某些低分子無機離子，作成固定化酶。